メモ;遺伝子挿入/トランスフェクションについて調べる

トランスフェクション(transfection)とは核酸を動物細胞内へ導入する過程を指す。

適切な環境下では、真核細胞は外来のDNAを取込むことができ、その一部は核に移行します。しかし、DNAのサイズや電荷、あるいは細胞に備わっている酵素や膜といった防御機構により、DNAの自然な取込みは大変効率の悪いものでした。

上記のように、動物細胞はウイルスよる導入以外は核酸の細胞内導入は滅多に起こらないが、遺伝子を一時的に発現させたり、遺伝子を安定して発現する細胞株を構築するために、取込み効率を改善するためにさまざまな手法が考案された。その結果、人為的にある程度自由に核酸を導入する事が可能になってきている。(トランスフェクションは一過的な(transient)導入と安定的(Stable)導入の違いがある。)1-7

・リン酸カルシウム法 8,9
・リポフェクション法
・DEAE デキストラン法
・エレクトロポレーション法
・マイクロインジェクション法:Glass micropipette を用いて、DNA を細胞内に注入する。
・パーティクル・ガン法:金属の微粒子をDNA でコーティングし、細胞内に打ち込む。
・形質導入:ウイルスを利用して遺伝子を細胞内に導入する。(←説明が…?)
・FuGENE 6 Transfection Reagent を用いた方法 4

参考;
1.トランスフェクション - Wikipedia
2.培養細胞への遺伝子導入法 概要わかりやすい
3.BioCellChallenge社から新製品のお知らせ - 重松貿易株式会社 化学品部
4.トランスフェクション試薬|スペシャルサイト|ロシュ・アプライド・サイエンス
5.http://www.roche-biochem.jp/sis/2010/07/post-89.html
6.トランスフェクション, 遺伝子導入 トランスフェクション試薬リスト:Life Technologies Japan Ltd.
7.細胞夜話 第16回:遺伝子導入法小史 - バイオダイレクトメール vol.53 歴史面も軽く触れられている、refあり
8.リン酸カルシウム法による遺伝子導入 - YouTube
9.改良リン酸カルシウム法による神経細胞のトランスフェクション
10.

まだまだ調査中。他にも良い詳説サイトやレビューありそうなので、紹介は暫定的なものとして考えてください。

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